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現(xiàn)貨進(jìn)口和國產(chǎn)ELISA試劑盒檢測結(jié)果確證分析
更新時間:2013-10-22   點擊次數(shù):1756次

 1 材料與方法
1) 對象
收集深圳市無償獻(xiàn)血者樣本共15400例。所有樣本均經(jīng)乙肝金標(biāo)試紙條篩查合格。
2) 檢查項目及標(biāo)準(zhǔn)
ELISA試劑盒血液篩查按衛(wèi)生部《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》。HBsAg中和實驗中和率>50%為確證陽性。
3) 方法
HBsAg篩查兩遍均采用ELISA法,確證實驗為中和實驗,對ELISA陽性而中和實驗陰性樣本應(yīng)用PCR法復(fù)證。
4) 試劑
HBsAg初篩為國產(chǎn)試劑,復(fù)查為進(jìn)口試劑,HBˉsAg中和試劑為美國諾泰公司產(chǎn)品。定性PCR采用美國諾泰公司和上海伊麗薩生物科技。
5) 儀器
瑞士TECAN RSP-200及瑞士MICRO STAR全自動加樣儀,ELISA試劑盒Microlab FAME和德國DADE Behring全自動酶免分析儀。德國ROCHE COBAS PCR分析儀和PE5700核酸擴(kuò)增儀。


2 結(jié)果
1) 以衛(wèi)生部臨床檢驗中心的1ng/ml HBsAg質(zhì)控血清,用正常血清稀釋隨標(biāo)本檢測,國產(chǎn)ELISA試劑盒檢測靈敏度為0.5ng/ml,進(jìn)口ELISA試劑盒為0.10ng/ml。用中和實驗對稀釋0.1ng/ml HBsAg質(zhì)控血清進(jìn)行10批次檢測,均成陽性結(jié)果。
2) 對15400人份血樣用國產(chǎn)和進(jìn)口ELISA試劑盒檢出HBˉsAg陽性樣本155份(占總數(shù)0.99%),經(jīng)中和實驗確證陽性122例,HBsAg真陽性檢出率為0.79%,對單進(jìn)口或國產(chǎn)試劑陽性而中和實驗確證陰性的標(biāo)本用PCR定性實驗檢測DNA復(fù)證, 33例(占總數(shù)0.21%)中和實驗和PCR結(jié)果均為陰性,提示ELISA結(jié)果可能為假陽性。

3)確證實驗陽性的122份樣本S/CO值
其中進(jìn)口試劑S/CO值分布以>3為大多數(shù),占91.7%,表 明進(jìn)口ELISA試劑盒靈敏度高,不易漏檢。國產(chǎn)ELISA試劑盒S/CO值分布以1~10之間為多數(shù)占65.5%,而1~0.7區(qū)間有11例,占9%,表明試劑靈敏度欠佳。

3 討論
由于兩種試劑靈敏度不同,其結(jié)果差異較大。在155例ELISA陽性樣本中,共122例確證陽性,其中國產(chǎn)試劑檢出88例,檢出率為72.1%,進(jìn)口試劑全部檢出,兩者差異有顯著性(X 2 =17.1,P<0.05)。在進(jìn)口試劑單陽性結(jié)果40例中,經(jīng)確認(rèn)34例為陽性,國產(chǎn)試劑未檢出,國產(chǎn)試劑存在一定的漏檢率。主要由于0.5~0.1ng/ml的HBV不能檢出的原因。在33例ELISA陽性確證實驗陰性樣本中,進(jìn)口試劑占6例,為18.2%,國產(chǎn)試劑27例,占71.8%,進(jìn)口試劑假陽性率明顯比國產(chǎn)試劑低。為減少輸血后乙肝感染,在復(fù)檢時采用高靈敏度特異性較好的進(jìn)口ELISA試劑盒是很有必要的。
由于中和實驗具有特異性高,可操作性強,ELISA試劑盒在對乙肝病毒DNA檢測條件要求很高的情況下,運用中和實驗進(jìn)行ELISA陽性結(jié)果的確定分析,具有很高的實用價值。

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