国产一级18禁止片大学生,日本女孩一级中文字幕,午夜激爽毛片在线看,亚洲av网站在线观看,亚洲色图欧美区偷拍,人人妻人人添人人爽人人欧美一区,深夜网站成人亚洲www,午夜福利国产在线128tv,99久久精品精品6精品精品,国产精品99久久免费黑人,国产成人综合在线观看网站,久久久久影院青青草原,1024国产精品视频一区,亚洲国产精品拍青青草原,日本精品一区久久久久久

    目前常用的幾種ELISA試劑盒方法有：測(cè)定抗體的間接法，測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。其主要過(guò)程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi)，加待測(cè)抗體，保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應(yīng)，用目測(cè)或光電。

三、操作步驟

①抗原包被：兔抗人IgG ELISA試劑盒作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜。

②洗滌：次日傾去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次。

③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.

④洗滌：用洗滌液洗3次。

⑤加待測(cè)樣品(一抗)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每個(gè)樣品平行做兩份，PBS 或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。

⑥洗滌：用洗滌液洗3次。

⑦加酶標(biāo)抗抗體：兔抗鼠IgG-HRP，用封閉液l ：8000稀釋，100μL／孔，加蓋37℃恒溫箱溫育1h。

⑧洗滌：用洗滌液洗5次，蒸餾水洗2次。

⑨顯色：加新鮮配制的底物溶液100μL/孔，室溫暗處放置5～30min，顯示藍(lán)色。

⑩終止反應(yīng)、比色：加50μL/孔終止液。ELISA試劑盒顏色變黃；用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 處各孔的吸光值，陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè) 樣品的效價(jià)。